鼠尾膠原蛋白I型，無菌溶液，溶解于0.006mol/L HAc

鼠尾膠原蛋白I型 Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail 產(chǎn)品別名：I型鼠尾膠原蛋白，Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail 產(chǎn)品型號：C20-200110 產(chǎn)品包裝：10mg/2ml 產(chǎn)品品牌：Perfemiker，大量現(xiàn)貨，上海秒發(fā)

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產(chǎn)品別名：Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail
產(chǎn)品型號：C20-200110
產(chǎn)品包裝：10mg/2ml
產(chǎn)品品牌：Perfemiker 產(chǎn)品描述：溶解于 0.006mol/L HAc，無菌溶液。   運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃保存，有效期1年。不可凍存。 產(chǎn)品介紹：        膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為廣泛。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結(jié)構(gòu)，被廣泛用于多種細(xì)胞的培養(yǎng)基質(zhì)，如肝細(xì)胞、纖維細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié)、雪旺氏細(xì)胞等。另外，I型膠原蛋白在細(xì)胞生長、分化、遷移和組織形態(tài)的發(fā)生等方面也具有重要應(yīng)用。        博飛美科的鼠尾膠原蛋白I型 (rat tailtendon collagen type I) 是通過Birkedal-Hansen 的方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿 ，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞、培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。 也可用于制備三維膠 ，模擬真實(shí)的生長環(huán)境 ，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長 。 Perfemiker鼠尾膠原蛋白包被的
培養(yǎng)皿中生長的 PC-12 細(xì)胞 Perfemiker鼠尾膠原蛋白三維膠中
生長的 NIH-3T3 細(xì)胞（接種后 5天） 和Sigma鼠尾膠原蛋白(cat# C7661)
SDS-PAGE 電泳對比。
A: Sigma B：Perfemiker   使用方法1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度： 1-5ug/cm2 以包被濃度為 2 ug/cm2 為例： 用無菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/ml。按表 (一)體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中：

確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面，開蓋在超凈臺上過夜晾干。 也可以在室溫放置 1小時(shí)后，用PBS洗3-4次后直接使用。 包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3個(gè)月以上的時(shí)間。 2、三維膠原的制備 Perfemiker鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。生友膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預(yù)冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水 A．不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul shengyou鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入100ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10xPBS，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul Perfemiker鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。   使用注意事項(xiàng)：   鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠 ,在操作過程中要盡量保持低溫 。